Алесандра Мусолини е родена през 1962 г. Завършва с отличие медицина и хирургия в Римския университет. Тя е член на колежа на лекарите и хирурзите в Рим. През 1992 г. е избрана за първи път за член на Камарата на депутатите на италианския парламент, а през 1994, 1996 и 2001 г. е преизбрана. През 2008 г. отново е избрана за член на Камарата на депутатите на италианския парламент, където е председател на Комисията по въпросите на детството и юношеството. През 2013 г. е избрана за член на Сената на Италианската република и за секретар на Председателството на Съвета. По време на политическата си кариера е избирана два пъти за градски съветник на Неапол, съветник за провинция Латина и съветник за регион Кампания. Член на Европейския парламент от 2004 - 2008 г., от 2014 - 2019 г. и от 2022 г.