Alessandra Mussolini gimė 1962 m. Romos universitete su pagyrimu baigė medicinos ir chirurgijos studijas. Ji yra Romos gydytojų ir chirurgų kolegijos narė. Pirmą kartą 1992 m. ji buvo išrinkta į Italijos parlamento Deputatų rūmus, o 1994, 1996 ir 2001 m. - perrinkta. 2008 m. ji vėl buvo išrinkta į Italijos Deputatų rūmus, kur ėjo Vaikystės ir paauglystės komiteto pirmininkės pareigas. 2013 m. ji buvo išrinkta į Italijos Respublikos Senatą ir Tarybos pirmininkavimo sekretore. Per savo politinę karjerą ji du kartus buvo išrinkta Neapolio miesto tarybos nare, Latinos provincijos tarybos nare ir Kampanijos regiono tarybos nare. 2004-2008 m., 2014-2019 m. ir nuo 2022 m. - Europos Parlamento narė.